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你是按這個程序操作AFT免疫親和柱的嗎?
點擊次數:27 發布時間:2021-01-07
  AFT(aflatoxin)免疫親和柱產品概述:
  AFT(aflatoxin)是一類真菌(如黃曲黴和寄生曲黴)的有毒性的代謝產物,是一種毒性極強的物質,具有很強的致癌性。AFT(aflatoxin)的危害性在於對人及動物肝髒組織的破壞作用,嚴重時可導致肝癌甚至死亡。在天然汙染的食品中以AFT(aflatoxin)B1常見,其毒性和致癌性也是極強的。在玉米、花生、小麥、棉花種子和一些幹果中常能檢測到AFT(aflatoxin)B1。
 
  反應原理:
  AFT(aflatoxin)B1免疫層析親和柱測定的原理是抗原抗體反應。AFT(aflatoxin)B1單克隆抗體固定於柱內凝膠上,樣品中的AFT(aflatoxin)B1經過提取、過濾、稀釋,然後緩慢通過AFT(aflatoxin)B1免疫親和柱,在柱內AFT(aflatoxin)B1與抗體特異性結合,之後洗滌免疫親和柱,除去未結合的其他物質。用甲醇洗脫AFT(aflatoxin)B1,注入到分析儀器中進行檢測。

  AFT(aflatoxin)免疫親和柱的操作程序:
  1、連接:將免疫親和柱後蓋取下,用剪刀剪開,重新蓋上,連接於泵流操作架的30mL注射器下;
  2、上樣:移取上述提取液移至注射器內,打開下端堵頭;
  3、富集:將空氣壓力泵與注射器連接,調節壓力使樣品提取液緩慢通過免疫親和柱,建議重力過柱;
  4、洗滌:用20mL蒸餾水分兩次加壓清洗,棄去全部流出液,並使2-3mL空氣通過柱體;
  5、洗脫:為保證洗脫充分,以2.0mL色譜級甲醇進行洗脫,重力洗脫即可。首先,將免疫親和柱內液體排幹,加1.0mL甲醇於柱管內,重力過柱,當溶劑通過柱子後;再加入1.0mL甲醇重複上述洗脫步驟,最後輕微加壓排淨洗脫液,合並洗脫液,將洗脫液濃縮吹幹,用1mL流動相複溶,渦旋30s溶解殘餘物,0.22μm濾膜過濾,待測。
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