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黃曲黴毒素免疫親和柱重要操作程序明細
點擊次數:889 發布時間:2019-01-15
 黃曲黴毒素免疫親和柱係列產品包括以下特點:
采用高特異性和高親和力的的單克隆抗體。
柱容量高,有效提高純化效率。
達到真菌毒素檢測的國內外限量標準。
良好的穩定性和可靠性,回收率達到90-95%。
 
操作程序
樣品準備:
以下隻是對一般樣品的操作過程。具體到某些樣品,可以在對操作過程進行調整。
適用樣品:玉米,小麥,燕麥,黑麥和大麥,奶製品。
 
樣品取樣:
真菌毒素分析的誤差來源是樣品的收集和取樣過程,所以要保證樣品收集和取樣具有代表性。
樣品提取:
步:稱取粉碎後的樣品,加入提取溶液;
第二步:用高速均質機攪拌,提取;
第三步:用漏鬥過濾樣品溶液;
 

樣品過柱純化
稱取粉碎後的樣品,加入提取溶液;
1.純化柱準備:取出黃曲黴m1免疫親和層析柱, 恢複至室溫,將上方塞子取出斜剪斷,再插回親和柱上,連接儲樣管和收集管;
2.加樣:加入10ml樣品液過柱,去掉親和柱下方堵頭,調節開關,流速為1ml/min左右。
3.洗滌:液體徹底排淨後,加入5ml10%甲醇水2次,流速為3ml/min左右。(如有需要,可重複洗滌幾次)
4.洗脫:液體排淨後,更換收集管,加入1.5-3ml甲醇,孵育2min,流速為1ml/min左右。
注:收集管中的洗脫液即為純化後的樣品,可直接用ELISA,熒光和液相等方法進行檢測。
 
可重複性(CV%):
純化後直接用於ELISA 法,液相色譜法,熒光光度法等。
穩定性:18個月
可以用於複雜樣品檢測,包括食品、飼料、調味品等多種複雜基質。
可用於黃曲黴毒素B1B2G1G2M1M2,嘔吐毒素,伏馬毒素,赭曲黴毒素和玉米赤黴烯酮的檢測。
 
產品功能:黃曲黴毒素免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的黃曲黴毒素m1,從而對黃曲黴毒素m1樣品起到非常針對性的純化作用,過柱淨化後的樣品液可直接用於液相進行黃曲黴毒素m1含量的檢測。親和層析柱與HPLC配合使用可達到快速測定的目的,以改善信噪比,可提高檢測方法的準確度。
 
反應原理:黃曲黴毒素免疫親和柱的測定的基礎是抗原抗體反應,黃曲黴毒素m1單克隆抗體連接在柱內凝膠上,樣品中的黃曲黴毒素m1經過提取、過濾、稀釋,然後將樣品提取液緩慢的通過黃曲黴毒素B1免疫親和層析柱,在免疫親和柱內,毒素與抗體結合,之後洗滌免疫親和柱除去沒有被結合的其他物質。用甲醇洗脫黃曲黴毒素m1,然後注入到分析儀器中用於檢測。
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